单环刺螠硫醌氧化还原酶的表达、纯化和复性

• 作者: 张志峰 谭志 马玉彬
• 来源期刊: 中国海洋大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 单环刺螠 硫醌氧化还原酶 蛋白表达与纯化 稀释复性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 81-86
• 分类号: Q786
• 字数: 5832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5174.2010.06.011

摘要

硫化物是1种广泛分布的有毒物质.硫醌氧化还原酶(SQR)是硫化物代谢的关键酶.单环刺螠是1种生活在潮间带下区及潮下带中的底栖生物.本研究为了获得具有活性的单环刺螠SQR,将其基因的开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行重组蛋白的表达,后采用稀释复性的方法对重组蛋白进行复性.经IPTG诱导后该重组蛋白主要以包涵体形式存在.用8 mol/L的尿素溶解包涵体后,通过镍离子金属螯合柱纯化获得重组蛋白.首次通过蛋白复性的方法获得具有活性的单环刺螠SQR,确定最佳稀释复性条件为pH=8.0,蛋白浓度20 μg/mL,L-精氨酸浓度0.2 mol/L,还原型谷胱甘肽∶氧化型谷胱甘肽=10∶1,复性时间为96 h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志峰	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	43	342	11.0	17.0
2	谭志	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	2	9	1.0	2.0
3	马玉彬	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	3	9	1.0	3.0