人溶菌酶基因的克隆和生物信息学分析

• 作者: 卢雪梅 朱家勇 梅寒芳 沈娟 肖明珠 褚夫江 金小宝 马艳
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人溶菌酶 克隆 生物信息学分析 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 26-29
• 分类号: Q786
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.06.185

摘要

目的:克隆人溶菌酶基因并进行生物信息学分析及构建其原核表达载体方法:采用RT-PCR法扩增人溶菌酶基因,运用相关生物信息学软件对其理化性质、疏/亲水性、功能结构域及蛋白质二级结构等进行分析.将该基因克隆入载体pET32a,PCR、双酶切鉴定和核苷酸序列测定.结果:获得约400bp的人溶菌酶基因,其序列与GenBank中公布序列完全一致.生物信息学分析显示人溶菌酶基因编码130个氨基酸,分子量为14.7kDa,理论等电点为9.28,含有一个功能结构域,二级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-转角组成.经PCR、双酶切鉴定和核苷酸序列测定,表明重级表达质粒构建成功.结论:该基因的克隆、生物信息学分析及原核表达质粒的构建为进一步研究其功能奠定了基础.