乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 吕婧 张栋 杨晓玲 牛勃 王惠珍
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 X基因 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 336-339
• 分类号: Q78
• 字数: 3650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.009

摘要

目的:构建含有天然完整的乙型肝炎病毒(HBV)X基因序列的真核表达载体,观察其在肝癌细胞株中的表达.方法:设计并合成HBV X基因的引物,用PCR方法从含完整HBV全基因的HepG2细胞中扩增X基因序列,并将其连接到真核表达载体pVAX-1上,酶切、PCR鉴定;用Triton X-114去除质粒内毒素后,采用电穿孔法将重组质粒pVAX-HBV X和空质粒pVAX-1分别转染SMMC-7721细胞,RT-PCR法检测HBV X基因mRNA的表达,Western印迹鉴定HBV X蛋白(HBx)的表达.结果:酶切和PCR鉴定证实pVAX-HBV X载体中包含完整的HBV X基因片段,该重组质粒转染的SMMC-7721细胞中HBV X基因mRNA及HBx蛋白的表达稳定.结论:构建了HBV X基因的真核表达载体,为X基因及其编码蛋白的生物学功能的研究提供了可靠的基因材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王惠珍	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	47	238	9.0	13.0
2	张栋	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	39	148	7.0	10.0
3	杨晓玲	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	6	16	2.0	3.0
4	牛勃	首都儿科研究所生物技术室	36	79	5.0	6.0
5	吕婧	山西医科大学生物化学与分子生物学教研室	7	6	2.0	2.0