猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 任夫波 单虎 张丽丽 张志 张燕霞 李晓成 杨若松
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 荧光定量聚合酶链反应 TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1048-1051
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因的保守序列,设计合成了1对特异引物和1条探针,以PCV2全基因阳性质粒作为标准品,经反应条件优化,建立了一种检测PCV2的荧光定量PCR方法.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果显示,该方法可特异地检测PCV2,而与PCV1等猪病病毒不发生交叉反应;该方法的灵敏度可达1×102copies/μL,比常规PCR高100倍;3次重复检测的变异系数均小于5%.用建立的荧光定量PCR和常规PCR分别对94份临床样品进行检测,荧光定量PCR的阳性检出率为51.06%,而常规PCR的阳性检出率仅为38.30%.证实,建立的方法具有快速、特异、灵敏、重复性好、定量、安全等优点,可用于PCV2的临床检测.