用兔抗人分化抑制因子3抗体建立双抗体夹心ELISA法及初步临床应用

• 作者: 仲爱芳 朱传东 李晓军 虞伟 贾丽 陈芳芳
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分化抑制因子3(Id3) 表达 纯化 多克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 350-352
• 页数: 3页
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文

摘要

目的 制备兔抗人分化抑制因子3(Id3)多克隆抗体,建立检测血清Id3的双抗体夹心ELISA技术.方法 用纯化的Id3重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗Id3多克隆抗体,通过多肽亲和层析柱去除非特异性成分,免疫细胞化学染色、免疫双向扩散及间接ELISA法检测抗体特异性和效价.制备辣根过氧化物酶(HRP)标记抗Id3,以纯化Id3重组蛋白为标准抗原制备标准曲线,建立定量检测人Id3的双抗体夹心ELISA法.结果 免疫细胞化学染色显示,制备的兔抗血清能与人Id3蛋白特异性结合,所得兔抗血清效价分别为1:8(琼脂双向扩散)和1:8 000(ELISA).ELISA法的包被抗体和酶标记抗体的工作浓度分别为5μg/ml和1:4 000,标准曲线为Y:0.079 3+0.018 8X,r:0.997.检测线性范围为2～64 U/ml,平均回收率为98.2%,批内平均变异系数(CV)为4.4%,批间平均CV为7.2%.该方法可用于人血清Id3含量的检测.结论 兔抗人Id3多克隆抗体的制备及夹心ELISA法的建立为今后研究Id3蛋白的功能及其在,临床和基础医学中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓军		109	618	13.0	19.0
2	贾丽		13	88	6.0	9.0
3	虞伟		76	313	10.0	13.0
4	陈芳芳		21	86	5.0	8.0
5	仲爱芳		2	1	1.0	1.0
6	朱传东		2	21	1.0	2.0