双抗夹心ELISA检测兔出血症病毒抗原方法的建立及初步评估

• 作者: 刘光清 刘腾 朱杰 李传峰 缪秋红 谭永贵 郭慧敏 陈宗艳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 单克隆抗体 双抗夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 3169字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种快速、特异性强的用于检测兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)抗原的双抗夹心ELISA方法,本研究通过抗体配对实验,确定以抗兔出血症病毒结构蛋白VP60单克隆抗体9H9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的9H9为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法.通过优化,确定最佳条件为:0.5μg/mL稀释后的9H9作为捕获抗体,底物显色液37℃包被2 h 4℃过夜,1%明胶溶液37℃封闭2 h,用含10%胎牛血清的PBST按5μg/mL稀释后的辣根过氧化物酶标记的9H9作为检测抗体,37℃作用15 min.建立的ELISA方法与杯状病毒科其他病毒无交叉反应,应用本方法和RT-PCR方法对85份兔肝脏样品进行检测,证明双抗夹心ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,有望作为临床快速检测的一种简便方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘光清	中国农业科学院上海兽医研究所	54	461	9.0	20.0
2	李传峰	中国农业科学院上海兽医研究所	32	102	4.0	9.0
3	陈宗艳	中国农业科学院上海兽医研究所	28	91	4.0	8.0
4	谭永贵	中国农业科学院上海兽医研究所	7	10	2.0	3.0
5	朱杰	中国农业科学院上海兽医研究所	14	13	3.0	3.0
6	郭慧敏	中国农业科学院上海兽医研究所	11	27	3.0	5.0
7	缪秋红	中国农业科学院上海兽医研究所	12	18	3.0	3.0
8	刘腾	中国农业科学院上海兽医研究所	6	14	3.0	3.0