兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法

• 作者: 刘家森 刘怀然 司昌德 姜骞 曲连东 秦海斌 韩凌霞
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原捕获 ELISA 单克隆抗体 兔瘟
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: S20-S24
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2007.08.024

摘要

用RHDV单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立兔瘟病毒 (RHDV) 抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价.结果 表明,单抗最佳包被浓度为1 μg/mL,兔多抗血清最佳浓度为4 μg/mL,本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26 ng/mL,对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA实验的3～13倍,对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7%,HA实验阳性检出率为55.2%,用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性.本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测.