流行性造血器官坏死病病毒抗原捕获ELISA建立

• 作者: 刘宁 刘金华 张利峰 张旻 景宏丽 江育林 谷强 高志强
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 流行性造血器官坏死病 抗原捕获ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 10-12,后插1
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体.利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株.将杂交瘤接种小鼠诱生腹水获得单抗3A4.以抗EHNV多克隆抗体为捕获抗体,单抗3A4为检测抗体,使用HRP标记的羊抗鼠IgG作为酶标二抗,建立了EHNV的抗原捕获ELISA方法.该方法可检出103TCID50的病毒液上清和0.0056μg的MCP重组蛋白.对纯化的GCRV、IHNV、IPNV、VHSV及SVCV病毒液进行检测,结果均为阴性,未发现交叉反应.本研究建立的EHNV抗原捕获ELISA方法,具有敏感、特异和重复性好的特点.通过应用于人工感染样品和临床样品的检测进一步证实了本检测方法的实用性.