重组人L型丙酮酸激酶N末端单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 廖婷婷 张晨阳 章崇杰 蒋小梅 魏大鹏
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 重组人L型丙酮酸激酶 糖代谢
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 571-574
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 制备抗人L型丙酮酸激酶N末端(PK-N)的单克隆抗体并对其特异性进行鉴定.方法 以PK-N-GST-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用ELISA、Western blot、免疫组化对此单克隆抗体特性进行鉴定.结果 筛选到两株能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的细胞株,亚类鉴定重链为IgGzb,轻链为kappa链.ELISA法测定腹水效价分别为1:409600和1:102400,抗体相对亲和力分别为3.54×108L/mol和2.72×108:L/mol.Western blot显示抗体能特异识别免疫原和人肝细胞株HL-7702中的天然丙酮酸激酶蛋白.免疫组化进一步显示了其在细胞及组织中的定位,均匀的分布于细胞的胞浆中.结论 成功制备了抗PK-N单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏大鹏	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	81	405	10.0	16.0
2	章崇杰	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	31	44	4.0	4.0
3	张晨阳	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	5	1	1.0	1.0
4	蒋小梅	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	9	27	4.0	5.0
5	廖婷婷	四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室	2	0	0.0	0.0