临床分离2型登革病毒突变株E蛋白N端158氨基酸基序免疫原性初探

• 作者: 商正玲 左丽 李佳怡
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 包膜蛋白 蛋白表达纯化 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 579-582
• 分类号: R392.1
• 字数: 4460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.07.001

摘要

目的:Ⅱ型登革病毒临床分离突变株(B株)E基因区部分序列的原核表达载体构建,蛋白表达、复性和纯化,及其免疫原性的初探.方法:将B株E基因1～476 bp序列克隆入原核表达载体pET28a(+),经酶切、测序鉴定正确后转入表达菌,IPTG诱导后将包涵体变性,复性,纯化后的蛋白免疫C57BL/6和BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并通过Western blot和ELISA进行抗体鉴定.结果:成功构建了pET28a(+)-B-E原核表达载体,在表达菌中以包涵体形式稳定高表达,分子量为20 kD.利用蛋白的His标签进行Western blot鉴定确定该蛋白为重组B-E蛋白,得到的可溶蛋白纯度大于90%.B-E蛋白免疫BALB/c和C57BL/6小鼠均可以得到有效的多克隆抗体.结论:B-E蛋白对BALB/c和C57BL/6小鼠具有免疫原性,其中ELISA鉴定免疫C57BL/6小鼠抗体的滴度为1∶12 800,Western blot鉴定免疫BALB/c小鼠抗体滴度为1∶500.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左丽	贵阳医学院免疫学教研室	98	378	9.0	15.0
2	商正玲	贵阳医学院免疫学教研室	15	34	4.0	5.0
3	李佳怡	贵阳医学院免疫学教研室	2	3	1.0	1.0