圆弧青霉碱性脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 张慧敏 李剑芳 谭中标 邬敏辰
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 圆弧青霉PG37 脂肪酶 毕赤酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1185-1189
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达圆弧青霉碱性脂肪酶(Alkaline lipase,Lip I).方法 采用RT-PCR法从圆弧青霉PG37中扩增lip Ⅰ基因的cDNA片段,克隆入表达质粒pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K.t/p I,转化入毕赤酵母GS115,筛选高拷贝重组子GS115/tip Ⅰ,甲醇诱导表达,并对诱导表达条件进行初步优化.结果 GS115/lip Ⅰ在培养基初始pH 6.0,甲醇添加量1.0%的BMMY培养基中,于30～C诱导96 h,发酵液上清中Lip Ⅰ的活性为10.5 U/ml.在培养基初始pH 9.0.甲醇添加量1.0%的BMMY培养基中,24℃诱导120 h,GSll5/lip Ⅰ发酵液上清中Lip Ⅰ的活性最高,达407 U/ml.结论 在毕赤酵母GSI 15中高效表达了具有活性的圆弧青霉Lip Ⅰ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学医药学院	163	1504	22.0	29.0
2	李剑芳	江南大学食品学院	52	513	12.0	21.0
3	张慧敏	江南大学食品学院	11	49	5.0	7.0
4	谭中标	江南大学生物工程学院	2	8	1.0	2.0