外源性红色荧光蛋白基因(RFP)在转基因唐鱼中的整合分析

• 作者: 叶星 姜鹏 李胜杰 白俊杰 简清 陈敏
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因鱼 唐鱼 红色荧光蛋白 整合 侧翼序列
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 968-974
• 分类号: S9
• 字数: 4499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.05.022

摘要

转红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)基因唐鱼(Tanichthys albonubes)的遗传符合孟德尔分离定律,为进一步了解RFP基因在转基因唐鱼基因组上的整合特点,采用PCR和Southern印迹检测转植基因的拷贝数和连接方式.结果表明,转植基因是以单位点、多拷贝(2～3个拷贝)、头尾相接(head-to-tail)的串联体形式整合.应用基因组步移技术分别克隆出1.0和1.2 kb的转植基因整合位点5'和3'侧翼区序列.序列分析表明,5'侧翼区为宿主唐鱼基因组序列,在GenBank数据库中经BLAST分析后未发现有同源序列;3'侧翼序列与P1噬菌体部分基因组序列同源性达到99%,非转基因唐鱼基因组中未检测到该侧翼序列.研究结果为转红色荧光蛋白基因唐鱼的遗传稳定提供了评价依据.