布鲁杆菌Cu-Zn SOD和GroEL的克隆表达及细胞免疫特性比较分析

• 作者: 于爽 付思美 徐杰 李竞 杜昕颖 杨毅 汪舟佳 王同坤 王玉飞 白耀霞 钟志军 陈泽良 陈燕芬 黄留玉
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 布鲁杆菌属 Gateway技术 免疫,细胞
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 1102-1105
• 分类号: R392.111
• 语种: 中文

摘要

目的 分析比较布鲁杆菌两种外膜蛋白Cu-Zn SOD和GroEL的细胞免疫特性.方法 以布鲁杆菌16M基因组为模板,PCR扩增Cu-Zn SOD和GroEL蛋白的基因序列.采用Gateway方法构建表达载体,在大肠埃希菌中诱导表达并纯化,用获得的纯化蛋白刺激减毒活疫苗S19免疫小鼠的脾细胞,并测定细胞上清中IFN-γ的水平.结果 成功克隆表达了Cu-Zn SOD和GroEL蛋白,用这两种蛋白刺激S19免疫小鼠脾细胞后,细胞上清中的IFN-γ水平明显升高,并且GroEL刺激后的IFN-γ水平高于Cu-Zn SOD刺激后的IFN-γ水平.结论 GroEL和Cu-Zn SOD蛋白均具有细胞免疫反应特性,且GroEL的细胞免疫反应特性强于Cu-Zn SOD.