杆状病毒AcMNPV p48基因在昆虫细胞中的表达

• 作者: 庞义 杨凯 胡朝阳 袁美妗 黄振球
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: AcMNPV p48基因 表达 剪切
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传和分子生物学
• 页码范围: 465-471
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

[目的]p48(ac103)基因在昆虫杆状病毒中高度保守,暗示其具有重要的生物学功能.为了研究该基因的功能,我们首先对该基因的表达特征进行描述.[方法]以杆状病毒代表种--苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)的p48基因为研究对象,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统分别构建了在P48蛋白N-端和C-端融合HA-标签,并且携带绿色荧光蛋白基因和多角体蛋白基因的重组Bacmid.将重组Bacmid转染Sf9细胞,收集含病毒的上清去感染Sf9细胞,在感染后不同时间点收集细胞进行SDS-PAGE电泳,利用商业化的HA抗体进行Western blot分析以检测融合蛋白在昆虫细胞中的表达情况.[结果]用C-端融合HA-标签的重组病毒感染细胞后12 h即可检测到一条43 kDa左右、能与HA抗体发生特异性结合的蛋白条带,该特异性蛋白的表达一直持续到病毒感染后96 h.从感染后48 h起一直到96 h,均能检测到另外一条约26 kDa的蛋白条带也能与HA抗体发生特异性结合.在N-端融合HA-标签的重组病毒感染的细胞中没有检测到与HA抗体特异结合的蛋白.[结论]结果表明,p48基因是个晚期基因,在病毒感染的晚期表达,并且该蛋白在昆虫细胞中表达时N-端可能被剪切.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庞义	中山大学有害生物控治与资源利用国家重点实验室	96	1022	17.0	28.0
2	杨凯	中山大学有害生物控治与资源利用国家重点实验室	15	53	4.0	6.0
3	袁美妗	中山大学有害生物控治与资源利用国家重点实验室	15	91	6.0	9.0
4	黄振球	中山大学有害生物控治与资源利用国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
5	胡朝阳	中山大学有害生物控治与资源利用国家重点实验室	1	4	1.0	1.0