铜绿假单胞菌mexA基因原核表达载体的构建

• 作者: 周光 权秋宁 沈定霞 程小平 罗燕萍 陈荣
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 mexA基因 载体
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 4-7
• 分类号: R349.6
• 字数: 2876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2010.06.002

摘要

目的 构建mexA基因的原核载体,为进一步表达MexA蛋白奠定基础.方法 从临床分离多重耐药的铜绿假单胞菌抽提DNA,经PCR扩增出mexAl基因与PUC18克隆载体连接,PCR、酶切及测序鉴定,再以PUC/mexA1质粒为模板PCR扩增mexA目的 基因,克隆至质粒pQE30中,构建表达质粒pQE30/mexA,构建的表达质粒pQE30/mexA转化大肠杆菌M15,培养后提取纯化重组质粒pQE30/mexA酶切鉴定.结果 获得长约1.5 kbPCR mexA1产物,酶切结果显示所构建的重组质粒PUC/mexA1已成功地克隆了mexA1(1.5 kb)基因,序列分析结果与PA01/mexA1序列相同,构建的表达质粒pQE30/mexA酶切鉴定,与插入pQE30的目的基因mexA(1.2 kb)片段相符.结论 含mexA(1.2 kb)基因的原核表达载体构建成功,为进一步表达MexA蛋白奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗燕萍	中国人民解放军总医院微生物科	15	123	5.0	11.0
2	沈定霞	中国人民解放军总医院微生物科	21	150	6.0	12.0
3	周光	中国人民解放军总医院微生物科	8	81	3.0	8.0
4	程小平	南昌大学第一附属医院检验科	13	20	3.0	3.0
5	陈荣	中国人民解放军总医院微生物科	9	13	3.0	3.0