SYBR Green荧光PCR检测美洲钩虫方法的建立

• 作者: 叶曦 李国伟 汪家旭 牛建军 黄建炜
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 美洲钩虫 rDNA ITS-2序列 荧光定量PCR SYBR Green I
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1110-1113
• 分类号: R383.1
• 字数: 2986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.12.007

摘要

目的 建立荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法.方法 提取虫体基因组DNA、根据GenBank中美洲钩虫ITS-2序列设计特异引物,PCR扩增ITS-2序列、克隆、测序和比对.常规PCR检验引物特异性.将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做灵敏性和重复性试验.结果 构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,实验重复性良好.结论 成功构建了SYBR Green I荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法,可用于快速、准确、定量检测美洲钩虫.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄建炜		33	145	6.0	10.0
2	牛建军		37	209	7.0	12.0
3	汪家旭		15	31	3.0	4.0
4	叶曦		12	75	5.0	8.0
5	李国伟		13	82	5.0	8.0