中国人源蓝氏贾第鞭毛虫ppdk基因的克隆及其表达产物的鉴定

• 作者: 张永轻 李雅杰 滕美君 王云华
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫 ppdk 克隆 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 834-839
• 页数: 6页
• 分类号: R382.2
• 语种: 中文

摘要

目的 获取中国人源性蓝氏贾第鞭毛虫ppdk基因及相关基因产物方法以中国人源性贾第虫基因组DNA为模板,设计引物进行PCR扩增,获取ppdk基因并进行测序分析.筛选得到的阳性克隆连接至原核表达载体pET28a(+),构建重组表达载体,并转化宿主菌大肠埃希菌感受态细胞E.coli BL21(DE3),进行重组蛋白的IPTG诱导表达.收集重组表达产物进行亲和层析纯化,再用Western blot进行免疫学分析鉴定.结果 序列测定分析可知,获得的阳性克隆插入片段包含一个2 655 bp的开放阅读框架;比对其基因序列发现,其与ATCC 50803(美国WB虫株C6株)的同源性可高达99%.该基因片段编码884个氨基酸,预测其表达蛋白的分子质量单位大小约为97.6 ku.Western blot显示该基因序列的原核表达产物能够被抗6个组氨酸标签的特异性抗体识别,提示重组表达产物为实验预期的目的 蛋白.结论 对贾第虫ppdk基因进行了克隆及原核表达,并对表达产物进行了纯化和免疫学初步鉴定,为贾第虫病治疗的高通量药物筛选等的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雅杰		31	88	4.0	7.0
2	滕美君		14	15	2.0	3.0
3	王云华		28	37	3.0	4.0
4	张永轻		4	8	2.0	2.0