抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 何生虎 李正锋 米荣升 陈兆国
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 隐孢子虫 CP15/60蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 63-67
• 分类号: S852.723
• 字数: 4224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.10.015

摘要

为获得高特异性的抗隐孢子虫单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),以原核表达的隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)子孢子表面抗原CP15/60为免疫原,免疫Balb/c小鼠.取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,用间接ELISA方法进行抗体效价测定,有限稀释法进行亚克隆.以常规染色体分析法进行杂交瘤细胞的染色体分析,用McAb亚类鉴定试剂盒鉴定McAb亚型、间接ELISA法测定相对亲和力及交叉反应性、Western blot检测抗体的特异性.结果获得了2株能稳定分泌抗重组CP15/60(recombinant CP15/60,rCP15/60)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为B4F7和D8H5,其腹水抗体效价均达到1∶107;染色体数目B4F7株为97条±4条、D8H5株为90条±7条,且观察到标志染色体;McAb亚型均为IgG1,轻链均为κ链;相对亲和力常数B4F7株为0.009 μg/mL、D8H5株为0.016 μg/mL;2种McAb均与rCP15/60蛋白发生特异性反应,与柔嫩艾美耳球虫卵囊可溶性蛋白、弓形虫裂殖子蛋白以及日本血吸虫虫体蛋白均无交叉反应,证实本试验获得了2株高特异性的抗隐孢子虫McAb.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何生虎	宁夏大学农学院	116	648	14.0	21.0
2	陈兆国		2	1	1.0	1.0
3	米荣升		2	1	1.0	1.0
4	李正锋	宁夏大学农学院	1	0	0.0	0.0