微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15/60基因的克隆与原核表达

• 作者: XIA Yan-fu YU Hui-zhu YUE Cheng 米荣升 陈兆国
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 微小隐孢子虫 CP15/60基因 克隆 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 670-675
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723|Q786
• 字数: 5507字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.006

摘要

提取微小隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA,用RT-PCR扩增微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15/60基因并克隆到pMD18-T载体中.将鉴定正确的序列亚克隆于原核表达载体pET-28b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫动物后检测血清抗体.结果显示,克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列的同源性为98.66%.目的基因在大肠杆菌中以可溶形式高效表达.表达的重组蛋白占菌体可溶性总蛋白的57.5%,纯化的重组蛋白纯度达95.2%.重组蛋白可被兔抗微小隐孢子虫血清特异性识别,用重组蛋白免疫3次后,兔血清特异性抗体达到较高水平.表明,该重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	YU Hui-zhu		1	9	1.0	1.0
2	陈兆国		1	9	1.0	1.0
3	YUE Cheng		1	9	1.0	1.0
4	米荣升		1	9	1.0	1.0