马铃薯SSR标记多重PCR反应体系优化研究

• 作者: 刘伟婷 刘尚武 吕典秋 李勇 王绍鹏
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯 SSR标记 多重PCR反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 17-23
• 分类号: S532
• 字数: 4381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2010.10.004

摘要

以马铃薯品种克新18为试验材料,探讨了多重PCR反应体系主要成分、引物不同比例关系及退火温度对SSR标记扩增的影响.在不改变其他成分浓度的条件下,对PCR反应体系的4个组分(Taq酶、MgCl2、模板DNA、dNTPs)进行浓度或用量梯度试验;利用正交设计L9(34)对反应体系的4对引物组合(STM0014、Pat、SSI、UGP)在3个水平上进行优化;最终确立了马铃薯SSR标记多重PCR反应优化体系,总体积为20μL;2.5μL 25 mmol·L-1MSCl20.6μL 10 mmol·L-1dNTPs,Taq 酶0.8 U,模板DNA 80 ng;4 mmol·L-1的4对引物之间的用量比为2:1:2:3,退火温度为54.7℃.优化后的反应体系重复性好,扩增结果稳定可靠,能够明显区分不同的马铃薯品种.为进一步探讨马铃薯品种资源遗传多样性、构建DNA指纹图谱打下了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟婷	黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江省马铃薯工程技术研究中心	8	106	5.0	8.0
2	李勇	黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江省马铃薯工程技术研究中心	94	254	9.0	12.0
3	刘尚武	黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江省马铃薯工程技术研究中心	8	24	4.0	4.0
4	王绍鹏	黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江省马铃薯工程技术研究中心	6	28	4.0	5.0