风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法及参考标准的建立

• 作者: 赵立红
• 来源期刊: 泰山医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 风疹病毒 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 TaqMan探针 标准品
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 908-910
• 分类号: R373.1
• 字数: 2783字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7115.2010.12.004

摘要

目的 建立风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,制备风疹病毒RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品.方法 设计引物与探针,优化PCR条件,建立风疹病毒RNA实时荧光定量RT-PCR方法,并制备风疹病毒RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品.结果 制备的风疹病毒特异性扩增子参考标准品为503 bp的片断,原液浓度为2.75×109 copies/μl,纯度为92%;采用该特异性扩增子参考标准品建立的标准曲线相关系数r为～0.9993(r2=0.9986),P<0.001.结论 本研究建立的风疹病毒特异性扩增子参考标准品稳定性好,纯度高;特异性扩增子参考标准品浓度的对数值与Ct值之间具有良好的线性关系,证实了本研究建立的风疹病毒RNATaqMan实时荧光定量RT-PCR方法定量的准确性.因而,建立的风疹病毒RNA实时荧光定量RT-PCR方法简便快捷、定量准确,可用于临床标本中风疹病毒RNA的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵立红	泰山医学院附属泰山医院检验科	4	9	2.0	2.0