鸡降钙素真核表达质粒pCEP4-CT的构建及细胞表达

• 作者: 俞路 全丽萍 卜祥斌 周光玉 张杰 徐建超 李治学 章世元 薛永峰
• 来源期刊: 上海畜牧兽医通讯
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 降钙素 真核表达载体 转染 IFA
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 2-4
• 分类号: S8
• 字数: 3411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7725.2010.02.001

摘要

构建重组鸡降钙素真核表达载体pCEP4-CT,转染非洲绿猴肾细胞(COS-1)并检测其表达.通过酶切方法自含鸡降钙素(CT)基因的克隆质粒pGEM-T-CT中扩增CT基因,并将其克隆到真核表达载体pCEP4中.阳性克隆鉴定后,在PEI介导下转染非洲绿猴转化肾细胞(COS-1),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测CT在COS-1中的表达状况.结果表明,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确;在COS-1细胞中检测到了CT的表达,为进一步探讨该基因在动物机体中调控钙代谢奠定了基础.