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白粉菌诱导的华东葡萄环化cDNA文库中抗病基因筛选
白粉菌诱导的华东葡萄环化cDNA文库中抗病基因筛选
作者:
张军科
朱自果
李爽
杜敬
王跃进
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
华东葡萄
cDNA文库
文库筛选
抗病基因
定量PCR
摘要:
[目的]从环化的中国华东葡萄白河35-1经白粉菌接种诱导后的叶片所构建的cDNA文库中,筛选抗病相关基因序列.[方法]根据植物抗病基因在氨基酸水平上的保守结构域NBS的P-loop区和LRR设计特异引物,采用三维文库筛选法,对环化的葡萄白粉菌接种诱导后的叶片cDNA文库进行PCR筛选.[结果]共建组池24个,每个组池中含有单菌落768个,包含18 432个克隆.从中筛选出具有抗病基因保守序列的阳性克隆585个,其中具有NBS保守序列引物筛选出330个,LRR保守序列引物筛选出255个.对获得的阳性克隆中的插入片段进行了测序,经生物信息学分析去除重复序列后,获得422条具有抗病基因保守结构域的基因序列,其中具有NBS保守序列的250条,具有LRR保守序列的172条,共有NBS和LRR保守序列的25条.[结论]经翻译分析,其中8条编码产物包含NBS的P-loop结构域(GW787739-787742、GW787746、GW787747、GW787749、GW787758),5条编码产物包含LRR结构(GW787743、GW787744、GW787750、GW787751、GW787753),1条华东葡萄特有基因(GW787754).从中选出具有不同抗病结构域的10条基因进行病源侵染过程中的基因实时定量表达分析,发现其中5条抗病相关基因的表达可被白粉菌接种所诱导,可能与白粉病侵染过程有关.
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文献信息
篇名
白粉菌诱导的华东葡萄环化cDNA文库中抗病基因筛选
来源期刊
中国农业科学
学科
农学
关键词
华东葡萄
cDNA文库
文库筛选
抗病基因
定量PCR
年,卷(期)
2010,(14)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
2944-2952
页数
分类号
S6
字数
语种
中文
DOI
10.3864/j.issn.0578-1752.2010.14.013
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抗病基因
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期刊影响力
中国农业科学
主办单位:
中国农业科学院
出版周期:
半月刊
ISSN:
0578-1752
CN:
11-1328/S
开本:
大16开
出版地:
北京中关村南大街12号
邮发代号:
2-138
创刊时间:
1960
语种:
chi
出版文献量(篇)
9193
总下载数(次)
12
总被引数(次)
254208
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
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