1株抗欧洲型和美洲型PRRSV核衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 姜平 李玉峰 王先炜 王晓丰 王海燕
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 核衣壳蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 30-34
• 分类号: S852.4
• 字数: 3451字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR方法扩增出欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SS-6毒株的核衣壳(N)蛋白基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上,构建了重组表达质粒pGEX-N,并将其转化到大肠杆菌BL21中,在诱导剂IPIG的诱导下获得高效表达,重组蛋白的分子量约为40 ku.用纯化的重组N蛋白免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体.经细胞融合获得一株可稳定分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株,命名为1B6,将其连续培养20代后仍能稳定分泌抗体.亚型鉴定结果为IgG1型,其轻链为κ链;间接免疫荧光试验和免疫印迹试验均证明,1B6单抗既能与欧洲型PRRSV反应,也能与美洲型PRRSV反应;ELISA检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1∶640,腹水的效价为1∶256 000,为猪繁殖与呼吸综合征的诊断奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	105	845	16.0	23.0
2	姜平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	186	1921	25.0	35.0
3	王海燕	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	19	218	8.0	14.0
4	王先炜	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	58	439	11.0	19.0
5	王晓丰	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	1	3	1.0	1.0