荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤方法初探

• 作者: 吴昊 孙玉 张洪海 柳雅立 石英 陈德喜 魏飞力
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体DNA 氧化损伤 荧光实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 320-324
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 4227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2010.03.002

摘要

目的 体外构建DNA氧化损伤模型,荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤.方法 体外应用亚甲蓝联合可见光(MBL)方法建立DNA氧化损伤模型,通过8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)特异性切割氧化损伤位点8-羟基鸟嘌呤(8-oxoG),运用荧光实时定量PCR法检测不同比例混匀的OGG1酶切与未酶切的DNA氧化损伤模板.结果 成功构建体外氧化损伤DNA模型,OGG1酶能特异切割氧化损伤位点;OGG1酶切DNA在定量PCR体系模板中所占比例,与线粒体DNA编码基因COⅡ扩增Ct值呈正相关.结论 自制OGG1酶具有良好的生物活性,可以联合荧光实时定量PCR检测DNA氧化损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昊	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	341	1409	17.0	25.0
2	柳雅立	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	44	167	7.0	10.0
3	石英	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	51	149	6.0	9.0
4	魏飞力	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	20	67	4.0	6.0
5	张洪海	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	33	227	6.0	14.0
6	孙玉	首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病实验室	20	30	4.0	4.0