人β干扰素基因定点突变及在sf9细胞中的表达和活性研究

• 作者: 李晓阳 郭学青
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 干扰素类 细胞 基因表达 突变
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1096-1098
• 分类号: Q786
• 字数: 1919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2010.10.018

摘要

目的 研究人β干扰素突变体在杆状表达系统中的高效表达,为新型基因药物的研制提供可行性.方法 采用PCR定点突变技术构建人干扰素bS17突变基因,克隆到pFastBacTM HT B上,获得重组转移载体pFastBac-IFNβS17.将pFastBac-IFNβS17转化入DH10BacTM细胞,得到Bacmid-IFNβS17.将Baemid-IFNβS17转染sf9细胞,筛选到重组病毒Bac-IFNβS17.将Bac-IFNβS17感染sf9细胞进行表达.结果 Southern-blot证明IFNβS17已插入重组病毒中(3.9 kb左右的杂交带);SDS-PAGE、蛋白质印迹证明IFNβS17在sf9细胞中得到了表达.实验表明sf9细胞中120 h的表达产物干扰素活性最高,为2.62×105 IU/mL.结论 突变基因在sf9细胞得到了高效表达,且表达的重组蛋白具有IFN的生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓阳	首都医科大学附属北京朝阳医院京西院区检验科	19	128	6.0	11.0