小麦热激蛋白60(HSP60)基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘国富 曹雪松 李芳芳 王媛媛
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: HSP60 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 2803-2805
• 页数: 3页
• 分类号: S512.1
• 字数: 2814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.06.016

摘要

[目的]构建小麦热激蛋白60基因的原核表达载体, 并在E.coli中进行高效表达.[方法]根据GenBank中收录的小麦热激蛋白60基因序列设计合成1对引物P1/P2,利用RT-PCR方法从小麦RNA中扩增小麦HSP60基因,应用基因重组技术构建pGEX-4T-1-HSP60表达载体,将构建好的小麦HSP60基因原核表达载体pGEX-4T-1-HSP60转化至大肠杆菌表达菌株E.coli-BL21感受态细胞.[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定鉴定正确后,与GenBank中收录的小麦HSP60基因序列比对分析,同源性达100%.在IPTG诱导下获得了目的蛋白,所表达的GST-HSP60融合蛋白分子量约为90 KD.蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期的大小一致.[结论]成功构建了pGEX-4T-1-HSP60的原核表达载体,在E.coli-BL21中高效表达了HSP60蛋白,为进一步研究该蛋白的功能及其作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘国富	聊城大学生命科学学院	16	58	5.0	6.0
2	曹雪松	聊城大学生命科学学院	23	50	4.0	6.0
3	李芳芳	聊城大学生命科学学院	8	20	3.0	4.0
4	王媛媛	聊城大学生命科学学院	7	21	3.0	4.0