大肠杆菌表达抗脂多糖因子的发酵条件优化

• 作者: 刘梅 姜珊 王宝杰 王雷 蒋克勇
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗脂多糖因子 大肠杆菌 发酵条件 优化
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 海洋农业
• 页码范围: 128-134
• 分类号: Q788
• 字数: 5706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0864.2011.04.20

摘要

抗脂多糖因子(anti-lipopolysaccharide factor,ALF)作为一种重要的抗菌肽,具有抗菌性强,抗菌谱广的特点.将中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)抗脂多糖因子基因ALF克隆至pET32a载体获得原核表达载体.为了提高ALF融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量,保持抑菌活性,对已构建的重组大肠杆菌的发酵条件进行了优化,通过单因素分析的方法,考察了五种不同的培养基对表达量的影响,并在LB +M9培养基的基础上对培养基各组分进行了选择和优化,确定最佳培养基组分为:2.5 g/L蔗糖,10 g/L酵母膏,2.4 g/L( NH4)2 SO4,12.8 g/L Na2HPO4,3 g/L KH2PO4,10.5 g/L NaCl,2mmol/L MgSO4,0.1 mmol/L CaCl2溶液.分析了多种因素对表达量的影响,结果表明,培养基pH调至6.5,在菌体OD600达到0.8时加入诱导剂IPTG至终浓度为0.5 mmol/L,33℃继续诱导5h,蛋白表达量最高.表达的融合蛋白可以抑制藤黄微球菌(Micrococcus luteus)在平板上的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王雷	中国科学院海洋研究所	192	2018	26.0	36.0
2	刘梅	中国科学院海洋研究所	41	550	11.0	22.0
3	王宝杰	中国科学院海洋研究所	21	222	8.0	14.0
4	蒋克勇	中国科学院海洋研究所	27	331	8.0	17.0
5	姜珊	中国科学院海洋研究所	20	132	6.0	11.0