猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较

• 作者: 刘捷 姜平 张莉莉 张长莹 李文良 李玉峰 陈闻
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪嗜血支原体 常规PCR 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 443-447
• 分类号: S852.6
• 字数: 3389字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.06.08

摘要

为了解猪嗜血支原体(Mycoplasma haemosuis)对猪群的感染情况并建立该病的检测方法,本研究根据GenBank登录的M.haemosuis 16S rRNA基因序列(FJ263944)设计合成PCR引物以及荧光定量PCR(FQ-PCR)引物和探针.以含16S rRNA基因的重组质粒为模板,通过对PCR反应条件的优化,建立检测M.haemosuis的PCR和FQ-PCR检测方法.结果表明,这两种检测方法均具有较好的敏感性和特异性,与常规方法相比,FQ-PCR方法的敏感性高1000倍;用这两种PCR方法检测20份临床样品,常规PCR方法的阳性率为60%(12/20),而FQ-PCR方法的阳性率为75%(15/20).这两种检测方法的建立为确定M.haemosuis在我国猪群的感染情况和建立该病动物模型提供有效的检测手段.