利用单因子和正交设计双重实验法优化鹧鸪茶RAPD-PCR反应体系

• 作者: 刘国民 曹嵩晓 李娟玲 罗轶奇
• 来源期刊: 农学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 鹧鸪茶 RAPD 影响因子 体系优化
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种
• 页码范围: 14-21
• 分类号: Q785
• 字数: 6866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7774.2011.04.004

摘要

为了建立鹧鸪茶RAPD-PCR的优化反应体系,首先通过单因素试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计方法,对影响鹧鸪茶RAPD-PCR反应的5种因素进行4水平优化试验.并运用SAS软件对试验结果进行了分析,最后确定优化的RAPD-PCR反应体系为:10×Buffer缓冲液2.5μL+Mg2+2.5 mmol/L+dNTPs 0.2 mmol/L+Taq DNA聚合酶1.5 U+S28引物0.48 mm01/L+ 80 ng模板,定容至25μL.PCR扩增程序为:94℃预变性4 min,然后按94℃变性30 s,38℃退火45 s,72℃延伸120 s,进行45个循环,最后72℃延伸10 min;16℃保存.该优化的RAPD-PCR反应体系具有良好的稳定性和重现性,可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娟玲	海南大学苦丁茶研究所	46	260	7.0	14.0
2	刘国民	海南大学苦丁茶研究所	71	594	14.0	21.0
3	曹嵩晓	海南大学苦丁茶研究所	3	40	3.0	3.0
4	罗轶奇	海南大学苦丁茶研究所	3	22	3.0	3.0