重组辛德毕斯病毒E基因痘苗病毒的构建

• 作者: 凡敏 刘振江 刘昊 刘燕瑜 岳云强 李国江 秦艳青 郭欢欢 金宁一 陆飞 鲁会军
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 辛德毕斯病毒 转移载体 绿色荧光蛋白 重组痘苗病毒
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 25-30
• 分类号: S852.659.6|Q78
• 字数: 2610字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.06.006

摘要

为了构建表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒,本研究通过基因重组的方法将辛德毕斯病毒E基因及绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）基因分别连接至痘苗病毒转移载体pSTK,酶切鉴定得到阳性重组质粒pSTK-SINE-EGFP。采用脂质体转染的方法,将该重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染BHK-21细胞,通过同源重组获得重组痘苗病毒。利用EGFP筛选阳性重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP,收集感染重组痘苗病毒的BHK-21细胞,SDS-PAGE电泳检测辛德毕斯病毒E基因在细胞中的表达情况,Western blot分析表达产物的免疫原性。结果证明辛德毕斯病毒E基因能在重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP中获得表达,且表达产物具有良好的免疫原性。表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒的成功构建,为研制辛德毕斯病毒活载体疫苗奠定了基础。