变异三角酵母D-氨基酸氧化酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘军 赵沁沁
• 来源期刊: 武汉工业学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 变异三角酵母 D-氨基酸氧化酶(DAAO) 基因克隆 诱导表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 食品科学与生物工程
• 页码范围: 22-25
• 分类号: Q785
• 字数: 2784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4881.2011.01.006

摘要

参照GenBank中D-氨基酸氧化酶基因序列设计引物,利用跨内含子PCR技术从变异三角酵母(Trigonopsis variabilis)基因组中扩增D-氨基酸氧化酶基因编码区序列.将DAAO基因用Nco Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后,与经相同酶切的大肠杆菌表达载体pET-28a连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),得到表达变异三角酵母D-氨基酸氧化酶的工程菌株BL21 (DE3)/pET-28a-DAAO.测序结果表明所克隆的基因序列与GenBank中变异三角酵母D-氨基酸氧化酶基因序列同源性达99%以上.SDS-PAGE分析及酶活测定表明所构建的工程菌能高效表达D-氨基酸氧化酶,且表达产物有较高酶活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘军	武汉工业学院生物与制药工程学院	41	397	12.0	18.0
2	赵沁沁	武汉工业学院生物与制药工程学院	4	26	3.0	4.0