利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人生长素

• 作者: 付凡 唐顺明 汪生鹏 沈兴家 赵巧玲 陈蔚 黄金山
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 家蚕核型多角体病毒 家蚕 人生长素基因
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 320-324
• 分类号: S881.2|Q78
• 字数: 4734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.02.022

摘要

人生长素是由腺垂体分泌的一种在人体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素,具有广泛的生理作用.利用家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bac-to-Bac表达系统,将人生长素基因(hgh)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,通过细菌转座子原理,转化BmDH10Bac细胞,获得重组穿梭载体质粒Baemid-hgh,并将其转染家蚕BmN细胞,获得含有hgh的重组杆状病毒.将此重组病毒感染家蚕BmN细胞,收集重组病毒液并穿刺接种家蚕5龄起蚕,3d后观察到家蚕感染了杆状病毒的症状,并通过SDS-PAGE和Western blotting方法在家蚕血液中检测到分子质量约20kD的目的蛋白,袁明人生长素通过Bac-to-Bac 系统在家蚕体内获得了表达.