2种PCR方法扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列比较

• 作者: 丁志鑫 刘晓庆 刘晶 崔喜艳
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 反向PCR 热不对称交错PCR 大豆 rbcS启动子
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 页码范围: 511-517
• 分类号: Q78|S565.1
• 字数: 3776字
• 语种: 中文
• DOI: 22-1100/S.20110419.0835.006

摘要

比较了扩增已知序列5’侧翼序列的2种PCR方法.方法一是反向PCR (IPCR),以大豆基因组酶切后的DNA片段自身环化产物做模板,用2对特异引物反向扩增大豆rbcS启动子5'侧翼序列.方法二是热不对称交错PCR(rAIL- PCR),以大豆基因组DNA为模板,用3个巢武特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环.IPCR和TAIL- PCR 2种试验方法分别扩增获得438 bp和867 bp特异产物.经测序发现:2片段两侧均含有设计的引物,其部分序列均与已知序列相一致,两者也有部分序列完全相同,但TAIL- PCR技术简单,重复性好,能够在短时间内获得目标片段,TAIL-PCR技术在克隆侧翼序列时优于IPCR.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔喜艳	吉林农业大学生命科学学院	62	454	14.0	18.0
2	刘晶	吉林农业大学生命科学学院	13	20	3.0	4.0
3	刘晓庆	吉林农业大学生命科学学院	4	42	4.0	4.0
4	丁志鑫	吉林农业大学生命科学学院	4	35	4.0	4.0