小反刍兽疫N蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA方法的建立

• 作者: 曾妮 李伟 李刚 田康乐 邱文英
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 单克隆抗体 竞争性ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 技术改进
• 页码范围: 967-972
• 分类号: S855.3
• 字数: 5100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.05.025

摘要

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种危害严重的急性接触性传染病.为了检测血清中存在的抗PPRV的抗体,本研究利用纯化后的真核表达的PPRV N蛋白重组蛋白(rBacmid-PPRN)作为免疫原免疫BALB/c小鼠(Mus musc ulus),并使用原核表达的PPRV N蛋白重组蛋白(rpET-PPRN)作为间接ELISA检测抗原,共筛选得到8株抗PPRVN蛋白的单克隆抗体(mAb).其中1D5单抗腹水效价达1:106,分泌单抗亚类为IgG2b.以1D5作为竞争抗体、纯化后的rpET-PPRN蛋白作为包被抗原,建立了检测小反刍兽疫血清抗体的单抗竞争性ELISA(c-ELISA)方法.所建立的c-ELISA方法能够特异性的区分牛瘟阳性血清和小反刍兽疫阳性血清,并具有较高的灵敏度和特异性.应用建立c-ELISA检测方法检测共129份山羊(Capra hircus)血清样品,与标准c-ELISA试剂盒的符合率为96.9％.本研究成功地建立了可特异性检测动物血清中抗PPRV抗体的竞争性ELISA方法,对小反刍兽疫的诊断、疫苗免疫水平的监控及控制其流行具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	111	742	14.0	23.0
2	李伟	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	190	2617	29.0	41.0
3	曾妮	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	10	67	4.0	8.0
4	邱文英	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	7	58	5.0	7.0
5	田康乐	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	3	36	3.0	3.0