高保真酶特异性检测大鼠SNP基因型新方法

• 作者: 岳秉飞 王淑菁
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高保真酶 SNP基因分型 硫代磷酸化修饰引物
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 69-73
• 分类号: R33
• 字数: 3550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.08.018

摘要

目的 应用高保真酶(Pfu)和3'末端修饰引物在单管双向等位基因特异性扩增(SB-ASA)中区分SNP基因型,建立高保真酶特异性检测SNP基因型的新方法.方法 选取近交系大鼠SNP位点,以RS8149053为例,设计两个外部引物和两个等位基因特异性引物,四引物3'末端进行硫代磷酸化修饰,应用高保真聚合酶(Pfu)进行特异性扩增,扩增结果测序验证其可靠性.结果 在RS8149053 SNP位点(C/T)上,等位基因型CC扩增出179 bp目的片段,基因型TT扩增出597 bp目的片段,基因型不同则扩增出分子量不同的片段,目的条带测序结果与Rat Genome Database数据库基因型结果一致,高保真酶扩增结果稳定且特异性强.结论 高保真酶等位基因特异性扩增技术能有效降低假阳性率,是一种快速、特异的SNP基因分型新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳秉飞		117	385	11.0	14.0
2	王淑菁		24	39	3.0	5.0