番茄不孕病毒BJ株系基因组测定与侵染性克隆

• 作者: 廖乾生 张海峰 施伟 王婷 金圣塔 陈集双
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄不孕病毒 基因组序列 侵染性克隆 3a基因
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1120-1126
• 分类号: S436.412
• 字数: 4247字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.06.019

摘要

番茄不孕病毒(Tomato aspermy virus,TAV)可侵染包括藜科(Chenopodiaceae)、茄科(Solanaceae)等在内的24个双子叶家族和3个单子叶家族的100多种植物,是具有重要经济价值的植物病毒之一.为研究TAV BJ株系(Tomato aspermy virus,TAV-BJ)的基因组功能,本实验对TAV-BJ基因组克隆测序,并构建侵染性克隆.以TAV-BJ侵染心叶烟(ic otiana glutinosa)的总RNA为模板,RT-PCR获得其RNA2和RNA3；以TAV-BJ的dsRNA为模板,RT-PCR获得全长RNA1,目的片段PCR产物克隆测序获得TAV-BJ基因组全序列信息.RNA1全长3 409 nt,编码994个氨基酸的1a蛋白；RNA2全长3 023 nt,含2个开放阅读框(open reading frame,ORF),2a ORF编码829个氨基酸的2a蛋白,2b ORF编码78个氨基酸的2b蛋白；RNA3全长为2 216 nt,包含2个ORF,3a ORF编码247个氨基酸的3a蛋白,外壳蛋白(coat protein,CP)ORF 编码219个氨基酸的CP蛋白(TAV-BJ基因组RNA1、2和3 GenBank登录号分别为HQ424163,HQ424164和HQ424165).TAV-BJ基因组cDNA克隆体外转录成RNA并接种于心叶烟上,结果表明转录产物在寄主上的症状反应和TAV-BJ病毒粒子RNA的接种相一致,TAV-BJ基因组cDNA侵染性克隆具有活性.由TAV-BJ各个基因片段与缺失2b基因的黄瓜花叶病毒Fny株系(Cucumber mosaic virus,CMV-Fny△2b)构建的假重组病毒接种于心叶烟,结果显示TAV-BJ的RNA2和RNA3能恢复CMV-Fny△2b在寄主上症状反应.嵌合型RNA3F3aTcp和RNA3T3aFcp的症状反应结果表明,F1F2△2bRNA3 T3aFcp在寄主上产生花叶症状与F1 F2△2bT3相一致.本研究获得TAV-BJ的基因组序列,成功构建侵染性克隆,同时发现TAV-BJ的3a基因具有CMV-Fny的2b基因的某些功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖乾生	浙江理工大学生命科学院	15	33	4.0	5.0
2	陈集双	浙江理工大学生命科学院	63	692	15.0	23.0
3	王婷	浙江理工大学生命科学院	5	4	1.0	2.0
4	施伟	浙江理工大学生命科学院	2	7	2.0	2.0
5	金圣塔	浙江理工大学生命科学院	1	3	1.0	1.0
6	张海峰	浙江理工大学生命科学院	1	3	1.0	1.0