人醛糖还原酶基因在酿酒酵母中的诱导表达及活性分析

• 作者: 刘建伟 刘静 叶玲 翟冰
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 醛糖还原酶 酵母 绿色荧光蛋白质 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 340-343
• 分类号: Q789
• 字数: 3230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1264.2011.00014

摘要

目的 建立人醛糖还原酶(AR)及其与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的酿酒酵母细胞表达株,检测细胞中目的基因的表达及蛋白活性.方法 将含目的基因AR及融合基因AR::GFP的重组质粒pYEX-BX转化酵母细胞INVScl,得到宿主菌株XAR,XAG及对照菌株YEX.观察酵母细胞生长曲线及GFP荧光信号；Northern blot检测细胞中AR mRNA转录；Western blot检测AR蛋白表达；荧光法测定AR活性.结果 三菌株生长速率无明显差异；XAG菌株相对荧光强度与生长时间成线性关系;XAR,XAG菌株分别有持续、稳定的目的基因mRNA转录及目的蛋白表达,并具有AR活性.结论 成功构建了AR基因的酵母表达株,为进一步将此细胞株应用于研究AR的致病机制及AR抑制剂的初步筛选打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建伟	解放军总医院老年医学研究所	40	183	8.0	11.0
2	叶玲	解放军总医院老年医学研究所	35	149	7.0	10.0
3	刘静	解放军总医院老年医学研究所	48	240	10.0	13.0
4	翟冰	解放军总医院老年血液科	13	49	4.0	6.0