梨内根-贝壳杉烯合酶基因克隆及表达分析

• 作者: 姜淑苓 李连文 欧春青 王斐 程飞飞 马力
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 梨 内根-贝壳杉烯合酶 赤霉素 矮化 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 677-682
• 分类号: S661.2
• 字数: 5141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2011.06.008

摘要

中矮1号(Pyrus communis)是中国农业科学院果树研究所选育的梨优良矮化砧木,为研究其矮化机理,应用同源克隆的方法从中矮1号叶片总RNA中克隆赤霉素合成过程中的关键酶——内根-贝壳杉烯合酶(KS)基因的cDNA全长序列,并对该基因在不同梨品种中的表达进行分析.结果表明:基于苹果基因组序列设计的特异引物从中矮1号的总RNA中扩增出了1个编码框全长为2214 bp的cDNA序列,其编码737个氨基酸残基,推断分子量为83.63 kD,等电点为5.37.其氨基酸序列与报道的其他植物KS氨基酸序列的相似性为53.61％～72.63％,其中,与板栗(AEF32083.1)的相似性最高,其氨基酸序列中包含植物KS基因所共有的YDTAWVAWVP和DDXXD保守结构域,因此,将分离到的基因命名为PcKS.早酥、锦香和中矮1号等不同梨品种的PcKS基因的cDNA序列仅有个别碱基差异,但编码的氨基酸序列完全一致,品种间不存在结构差异.RT-PCR表达分析结果表明,PcKS基因在早酥中的表达量低于同时期的锦香和中矮1号,与植株高度相反,初步表明该基因的表达有与梨植株生长势呈负相关的趋势.