利用单因子和正交设计双重实验方法优化广藿香ISSR-PCR实验体系

• 作者: 刘国民 戴景 曹嵩晓 李娟玲 王艺
• 来源期刊: 热带生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 广藿香 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 35-41
• 分类号: S567.21
• 字数: 3996字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7054.2011.01.007

摘要

为了建立广霍香优化的ISSR-PCR反应体系,首先通过单因子试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计的方法,对影响广藿香ISSR-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验.结果表明:广藿香ISSR-PCR的优化反应体系最终确定为:在25μL反应体系中,含DNA模板40ng,MG2+浓度为2.5 mmol·L-1,引物浓度为0.3μmolol·L-1,Taq DNA聚合酶用量为1.5 U,dMPs浓度为150μmol·L-1.PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,然后按94℃变性45 s,52.7℃退火45 s,72℃延伸90 s,进行40个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娟玲	海南大学苦丁茶研究所	46	260	7.0	14.0
2	刘国民	海南大学苦丁茶研究所	71	594	14.0	21.0
3	王艺	海南大学苦丁茶研究所	5	23	2.0	4.0
4	曹嵩晓	海南大学苦丁茶研究所	3	40	3.0	3.0
5	戴景	海南大学苦丁茶研究所	1	21	1.0	1.0