籽鹅催乳素基因的克隆及诱导表达条件的优化

• 作者: 于志国 杨焕民 符亚原 计红 郭丽
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 籽鹅 催乳素基因 克隆 表达 Western blot
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 31-35
• 分类号: S835
• 字数: 4476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2011.06.010

摘要

运用RT-PCR方法,获得籽鹅脑垂体催乳素（Prolactin,PRL）基因编码区序列cDNA,克隆到pMD18-T载体上。DNA序列分析表明,PRL cDNA全长690 bp,编码230个氨基酸残基,与皖西白鹅的碱基同源性达99.57%,氨基酸同源性达99.56%。将所得序列与表达载体pET-32 a（＋）构建表达质粒pET-32 a（＋）-PRL。该质粒的DH5α转化菌经终浓度为1 mmoL.L-1的IPTG在37℃环境下诱导5 h可表达PRL基因融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的29.63%。用纯化的融合蛋白和凝血酶酶切后的单体蛋白主动免疫小白鼠,经Western blot检测,所制抗体清晰地检测到PRL基因表达蛋白的特异带,由此证明PRL基因的融合蛋白和凝血酶酶切后的单体蛋白均有较好的免疫原性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨焕民	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	194	1084	14.0	23.0
2	计红	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	74	330	11.0	15.0
3	于志国	黑龙江省大庆石油管理局农场	4	3	1.0	1.0
4	郭丽	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	32	62	5.0	6.0
5	符亚原	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	9	11	2.0	2.0