摘要:
目的:利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transformed infrared spectrum,FT-IR)技术探讨肿瘤细胞共培养对不同分化阶段树突状细胞(dendritic cells,DCs)的脂含量和蛋白质二级结构的影响,为深入理解肿瘤的免疫逃逸机制寻找线索.方法:免疫磁珠法分离人CD14+单核细胞,以经典方法将其诱导为未成熟DCs(immature DCs,imDCs)和成熟DCs(mature DCs,mDCs),分别将imDCs和mDCs与肝癌细胞株BEL7402、红白血病细胞株K562以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养48 h,正常培养的DCs作为对照.采用FT-IR技术研究不同肿瘤细胞对不同分化阶段DCs的脂含量和蛋白质二级结构的影响.结果:与正常培养的DCs相比,与肿瘤细胞BEL7402和K562共培养后imDCs和mDCs的膜磷脂成分减少(2.718±0.296,3.124±0.361 vs 4.855±0.324,P<0.05;2.964±0.136,3.522±0.173 vs 4.217±0.206,P<0.05),而总的脂含量增加(3.768±0.185,3.591±0.197 vs 2.487±0.212,P<0.05;4.288±0.156,4.155±0.167 vs 3.233±0.206,P<0.05);蛋白质α-螺旋含量减少(1.863±0.192,1.754±0.169 vs 2.364±0.188,P<0.05;1.124±0.133,1.016±0.107 vs 1.392±0.113,P<0.05),β-折叠(3.397±0.225,3.433±0.236 vs 2.486±0.198,P<0.05;2.646±0.209,2.591±0.216 vs 1.558±0.159,P<0.05)阳转角含量(4.366±0.284,4.322±0.266 vs 3.127±0.272,P<0.05;2.675±0.221,2.627±0.235 vs 1.773±0.181,P<0.05)增加;并且mDCs比imDCs更容易受到肿瘤来源因素的影响.结论:与肿瘤细胞共培养能够导致mDCs和imDCs的脂含量和蛋白质二级结构发生改变,可能是肿瘤导致DCs功能损伤的结构基础.