谷氨酸棒杆菌SYPS-062 L-丝氨酸脱水酶活性分析及其基因敲除对L-丝氨酸积累的影响

• 作者: 张晓梅 窦文芳 许正宏 许泓瑜 金雪霞
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: L-丝氨酸 谷氨酸棒杆菌 sdaA L-丝氨酸脱水酶
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 29-34
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)SYPS-062基因组DNA为模板,扩增得到L-丝氨酸脱水酶(L-SerDH)的编码基因sdaA.将其克隆到表达载体pET-28a(+),并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达,对纯化的L-SerDH进行了酶活测定,并与来自C.glutamicum ATCC13032的重组L-SerDH进行了比较,结果显示,两种不同菌株来源的重组L-SerDH降解L-丝氨酸的酶比活力差异并不显著.在此基础上敲除菌株SYPS-062的sdaA基因,探讨该基因对C.glutamicum SYPS-062生长及产酸的影响.通过构建自杀型重组质粒pK18mobsacB-ΔsdaA,电击转入C.glutamicum SYPS-062中,以同源重组的方式获得了sdaA基因缺失突变株,并用PCR方法对突变株C.glutamicum YPS-062ΔsdaA进行了验证.与出发菌株相比,突变菌株生长缓慢,单位菌体L-丝氨酸的产量(YP/X)提高了15.13%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许正宏	江南大学医药学院制药工程研究室	241	1740	20.0	30.0
5	窦文芳	江南大学医药学院制药工程研究室	55	278	10.0	13.0
6	张晓梅	江南大学医药学院制药工程研究室	53	428	11.0	18.0
7	许泓瑜	江南大学医药学院制药工程研究室	77	764	14.0	23.0
8	金雪霞	江南大学医药学院制药工程研究室	1	6	1.0	1.0