3种实蝇基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系的建立

• 作者: 余德亿 姚锦爱 方大琳 胡进锋 陈峰 黄鹏
• 来源期刊: 农学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 实蝇 基因组DNA提取 ISSR-PCR反应体系 建立
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 22-28
• 分类号: Q969.93|Q781
• 字数: 6382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7774.2011.03.005

摘要

为探讨高品质实蝇基因组DNA提取,研究模板DNA浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量、dNTP浓度、退火温度及时间对ISSR-PCR扩增结果的影响,以3种实蝇为材料,建立通用且稳定的实蝇ISSR-PCR反应体系.结果表明:获得了高品质实蝇基因组DNA;确立了通用且稳定的实蝇ISSR-PCR反应体系:10×PCR Buffer 2.5μL,模板DNA 50 ng,引物0.25μmol/L,Taq DNA聚合酶0.50 U,dNTP 200umol/L,最后加ddH2O至25 μL;明确了ISSR-PCR扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性30s,52.4℃退火45 s,72℃延伸90 s,循环36次,最后72℃延伸7 min,4℃保存.体系的建立弥补了实蝇传统形态检测的不足,为快速准确鉴定、种群异质性及遗传多样性分析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈峰	福建省农业科学院植物保护研究所	35	232	10.0	13.0
2	余德亿	福建省农业科学院植物保护研究所	56	435	12.0	18.0
6	胡进锋	福建省农业科学院植物保护研究所	26	172	9.0	11.0
7	姚锦爱	福建省农业科学院植物保护研究所	50	316	11.0	15.0
8	黄鹏		37	186	9.0	11.0
9	方大琳		12	53	3.0	7.0