环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立

• 作者: 丁文超 史雨红 李明云 陈炯
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 对虾白斑综合征病毒 VP26基因 环介导恒温基因扩增检测技术
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 技术改进
• 页码范围: 186-190
• 分类号: S9
• 字数: 3967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.01.027

摘要

DNA环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术,其检测结果可以通过琼脂糖凝胶电泳观察,也可以通过加入核酸染料SYBR Green I进行肉眼观察.本研究根据对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的结构蛋白VP26基因序列,设计一套引物,成功建立了针对WSSV的LAMP检测方法.应用该方法,在65℃温育1h的条件下快速扩增病毒基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带;在反应体系中添加SYBR Green I染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果.该研究建立的LAMP法能特异性检出WSSV,其检测下限比PCR法低一个数量级,相当于0.563 pg/μL的质粒印MD19-T-VP26)浓度.表明所建立的WSSV LAMP检测法特异性好、灵敏度高、操作简单方便,有望作为WSSV快速诊断的常规方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	100	594	13.0	18.0
2	史雨红	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	47	397	10.0	18.0
3	李明云	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	156	1723	22.0	34.0
4	丁文超	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	6	98	5.0	6.0