两株登革2型病毒NS1基因真核重组质粒免疫BALB/c小鼠产生特异性抗体水平的比较

• 作者: 任丽娟 左丽 朱海东 胡方芳
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 登革2型病毒 NS1基因 重组质粒 BALB/c小鼠 体液免疫应答
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 350-355
• 分类号: R57
• 字数: 4524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2011.04.016

摘要

目的 利用登革2型病毒(dengue type 2 virus,DENV2)M株和NGC株NS1基因部分扇列PcDNA3.1重组质粒初次和加强免疫BALB/c小鼠,观察免疫小鼠体液免疫应答的差异.方法 分别构建两株DENV2 NS1基因部分序列(1-413 bp)的PcDNA3.1真核重组质粒和pET28a(+)质粒,进行原核蛋白的表达、鉴定、纯化和定量;并用pcDNA3.1重组质粒免疫BALB/c小鼠,初次免疫及第7天、14天分别加强免疫1次,共免疫3次.收集初次免疫后第7、14、28和56天外周血标本,间接ELISA法测定小鼠血清特异性IgM/IgG类抗体水平,细胞病变抑制法检测特异保护性抗体水平.结果 构建了pET28a(+)-NS1m/pET28a(+)-NS1n原核表达重组质粒,SDS-PAGE分析表明,NS1基因部分序列获得表达,其相对分子质量均约22.3×103;Western blot表明该目的 蛋白可与抗His标签单克隆抗体结合;经Ni柱亲和层析法得到纯度达92%的表达蛋白,对C6/36细胞有毒性,并可用于ELASA检测.不同DENV2毒株NS1基因部分序列的pcDNA3.1重组质粒初次和加强免疫BALB/c小鼠诱导特异性IgM、IgG类和中和抗体的产生存在差异,M株重组质粒加强免疫小鼠后特异性抗体效价水平较高并持续较长时间.结论 DENV2两毒株NS1基因部分序列重组质粒免疫小鼠后诱生的特异性抗体类别、水平存在差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左丽	贵阳医学院免疫学教研室贵州省疾病预防控制中心	98	378	9.0	15.0
2	任丽娟	贵阳医学院免疫学教研室贵州省疾病预防控制中心	1	0	0.0	0.0
3	朱海东	贵阳医学院免疫学教研室贵州省疾病预防控制中心	1	0	0.0	0.0
4	胡方芳	贵阳医学院免疫学教研室贵州省疾病预防控制中心	1	0	0.0	0.0