PGC-1α辅助激活人PEPCK基因转录

• 作者: 任琢琢 何圣清 曾龙驿 梁华 王曼曼 翁建平 舒冏 陈燕铭
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 糖异生 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 过氧化物酶体增殖物辅助激活因子1α 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 191-196
• 分类号: R587.1
• 字数: 5156字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因启动子荧光素酶报告质粒PGL3-hPCK-luc,并探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ辅助激活因子1α(PGC-1α)在转录因子肝细胞核因子4α(HNF4α)介导下对人PEPCK基因启动子活性的影响.[方法]从人全血基因组DNA中克隆PEPCK启动子基因片段,并重组进荧光素酶报告载体PGL3-basic,将pcDNA3.1-PGC-1α、pcDNA3.0-HNF4α表达质粒与PGL3-hPCK-luc按不同组合共转染进人肝癌细胞株HepG2细胞或正常人肝细胞株LO2细胞,培养48 h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性.[结果]通过酶切鉴定及测序证明扩增的人PEPCK启动子片段成功插入载体质粒中.转染后人PEPCK启动子基因荧光素酶活性较空白对照组增加60倍(P<0.05);共转染质粒进HepG2细胞或LO2细胞后,HNF4α均可以增强人PEPCK启动子基因荧光素酶活性,在HepG2细胞,荧光素酶活性是对照组的2.69倍(P<0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是对照组的3.64倍(P<0.05);PGC-1α可以明显增强HNF4α对人PEPCK启动子的激活作用,在HepG2细胞,荧光素酶活性是PGL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.01倍(P<0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是PCL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.82倍(P<0.05).而与单一转染组相比,共转染pcDNA3.1-PGC-1α与pcDNA3.0-HNF4α显著增加了PEPCK的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05).[结论]人PEPCK启动子基因报告质粒成功构建,且转录因子HNF4α可以激活人PEPCK启动子活性,辅助激活因子PGC-1α可以进一步加强HNF4α的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何圣清	中山大学附属第三医院内分泌科	5	46	2.0	5.0
2	陈燕铭	中山大学附属第三医院内分泌科	78	531	11.0	20.0
3	王曼曼	中山大学附属第三医院内分泌科	58	468	11.0	19.0
4	舒冏	中山大学附属第三医院内分泌科	40	242	8.0	13.0
5	梁华	中山大学附属第三医院内分泌科	21	48	4.0	5.0
6	任琢琢	中山大学附属第三医院内分泌科	5	17	1.0	4.0
7	曾龙驿	中山大学附属第三医院内分泌科	162	970	16.0	25.0
8	翁建平		2	53	1.0	2.0