rDNA介导的酿酒酵母稳定表达载体的构建

• 作者: 何家亨 屠俊 张桂敏 曾毓芳 陈雅兰 马立新
• 来源期刊: 菌物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 酿酒酵母 rDNA介导 糖化酶 生物安全性 剂量效应
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 39-45
• 分类号: Q94
• 语种: 中文

摘要

将一段含有质粒ColEI复制起始区(ori)和氨苄青霉素抗性基因(bla)的DNA片段插入到酿酒酵母rDNA片段中部的EcoR I或Hpa I位点之间,在pYES2载体的基础上构建了两个rDNA介导的酿酒酵母稳定表达载体pHBM367E或pHBM367H.将黑曲霉糖化酶基因导入载体pHBM367H,获得表达载体pHBMl66.为生物安全性的考虑,pHBMl66经npa I酶切去掉2.2kb的ColEI ori和bla片段后转化酿洒酵母Y33菌株,获得不含任何抗生素抗性基因的工程菌.随后,对糖化酶基因在酿洒酵母中的表达、稳定性进行了分析,结果显示,rDNA介导的糖化酶基因在酿酒酵母中的表达呈现不同的剂量效应,挑选高表达的菌株传80代之后仍能保持其产糖化酶的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂敏	湖北大学生命科学学院	41	239	9.0	13.0
2	马立新	湖北大学生命科学学院	77	616	14.0	21.0
3	何家亨	湖北大学生命科学学院	3	12	2.0	3.0
4	曾毓芳	湖北大学生命科学学院	1	6	1.0	1.0
5	陈雅兰	湖北大学生命科学学院	1	6	1.0	1.0
6	屠俊	湖北大学生命科学学院	1	6	1.0	1.0