人乙酰肝素酶基因真核表达载体的构建与表达

• 作者: 吴志坚 林月霞 田素娟 董斌 袁茵
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乙酰肝素酶基因 真核表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 医学研究
• 页码范围: 427-429
• 分类号: Q785
• 字数: 2124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2011.04.024

摘要

目的 构建人乙酰肝素酶基因（HPA）的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,初步探讨其在人胚肾细胞293T中的表达情况.方法 以pOTB7/HPA质粒为模板,PCR扩增HPA基冈,经限制性内切酶酶切后,连接到pEGFP-N1载体上,并对重组表达载体pEGFP-N1/HPA进行酶切与测序鉴定.用脂质体lipefectmine2000为介导转染至293T细胞中,观察该基因在293T细胞中的表达情况.结果 经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实pEGFP-N1/HPA基因在771 bp处碱基c突变成t；在919 bp处碱基a突变成g,两处突变均为同义突变.该基因转染293T细胞48 h后,在荧光显微镜下可见转染的293T细胞有绿色荧光蛋白表达.结论 成功构建人乙酰肝素酶基因的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,并在人293T细胞中成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林月霞	广东药学院生命科学与生物制药学院	23	154	6.0	11.0
2	董斌	广东药学院生命科学与生物制药学院	14	85	5.0	9.0
3	袁茵	广东药学院生命科学与生物制药学院	16	51	5.0	6.0
4	田素娟	广东药学院生命科学与生物制药学院	22	120	6.0	10.0
5	吴志坚	广东药学院生命科学与生物制药学院	1	0	0.0	0.0