人Nanog基因重组腺病毒载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达

• 作者: 严家来 孙靖 张徐 徐哲 许文荣 钱晖 钱茜 陈圆 高硕
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Nanog 脐带间充质干细胞 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 222-224
• 页数: 3页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的 构建重组人Nanog基因腺病毒栽体(Ad-Nanog),转染人脐带间充质干细胞(hucMSCs),用于后续研究.方法 设计含有Kpn Ⅰ及Xho Ⅰ酶切位点的引物,PCR扩增Nanog基因,将扩增产物亚克隆到pAdTrack-CMV穿梭质粒上,经双酶切和基因测序鉴定,重组穿梭质粒经Pine Ⅰ线性化后,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组,筛选获得Ad-Nanog重组腺病毒质粒.经Pac Ⅰ酶切线性化,脂质体转染293A细胞,包装和扩增病毒,并感染hucMSCs.结果 重组腺病毒质粒经PCR和双酶切鉴定正确,测序结果 和设计片段的序列一致.荧光显微镜下观察在感染的hucMSCs中绿色荧光蛋白高效表达.结果 成功构建了Nanog腺病毒表达栽体,能高效转染hucMSCs,可用于后续转基因的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许文荣		156	795	13.0	20.0
2	钱晖		88	346	9.0	14.0
3	徐哲		7	23	3.0	4.0
4	张徐		27	108	7.0	9.0
5	陈圆		2	2	1.0	1.0
6	高硕		7	3	1.0	1.0
7	孙靖		5	3	1.0	1.0
8	严家来		2	0	0.0	0.0
9	钱茜		3	0	0.0	0.0